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啮齿类动物胰管开口的比较及胰液采集方法
来源:未知 |发布时间:2018-11-07 19:03|点击:
动物实验中,经常要釆集实验动物各种体液,如胃液、胰液、肠液、尿液等。胰液是动物体内重要的体液组成,胰液量及其成分的变化可反映动物的消化功能及内分泌代谢异常情况。大动物胰腺腺体大,胰管粗,肉眼易于识别,但对于啮齿类动物来说,由于个体小管细,操作十分困难。以往的有关资料中,相关内容介绍极少,仅对大鼠的胰管开口文献中曾有少量介绍-。显然,弄清啮齿类动物胰管分布、开口位置及种间差别,对了解其解剖构造和准确收集胰液具有十分重要的意义。为此,作者以小鼠、大鼠、豚鼠为例,对啮齿类动物胰管开口及胰液釆集方法进行了探讨,并对不同种间进行了比较.
1材料与方法
1.1材料
1.1.1动物ICR小鼠、SD大鼠、英国种豚鼠,由南京军区医学动物实验中心提供,合格证号:苏动质字97001号.
1.2器械眼科镊,眼科手术剪,显微镊,显微手术剪,4/0、1/0、0/0线,PG-10管(内径0.6m),聚乙烯塑料软管(内径2mm),体视显微镜。聚乙烯塑料软管.
1.3药品1%氯胺酮、生理盐水、美蓝
1.2胰管分布与开口位置识别方法
1.2.1小鼠以1氯胺酮100mg/kg体重腹腔注射,麻醉后呈仰卧位固定在小鼠固定板上被皮去毛,在腹部正中偏上作一小切口暴露肝脏和胆囊。将内径0.6m的PG-10管顶端剪成斜口然后在胆囊下贯穿一根4/0线,左手用显微镊夹住胆囊的壁,右手插管,穿透胆囊壁人胆囊。插入后用事先准备好的线结扎、固定插管。在胆总管与十二指肠交界处轻轻分离胆总管,结扎。注意不要弄破小血管。将注射针头插入插管内,用吸有美蓝的注射器缓缓地推进美蓝美蓝沿着肝总管进入胆总管,又沿着开口在胆总管处的胰管进入胰腺,胰腺组织及胰管着色呈蓝色。注意推动注射器的压力,压力过大,不易分辨胰管分布及开口压力过小,美蓝不能沿着细长的胰管到达各胰腺组织.
1.2,2大鼠以1%氯胺酮150mg∧kg体重腹腔麻醉、固定,暴露肝脏。大鼠无胆囊,但胆总管较粗。将内径2m顶端剪成斜口,然后在肝管靠肝脏的膨大部贯穿一根1/0线,将肝管斜剪一小口,左手持显微镊,右手沿斜剪的小口插管入肝管内,插入后结扎、固定插管。在胆总管与十二指肠交界处轻轻分离胆总管,结扎。用注射器由插管缓缓推入美蓝,美蓝沿胰腺开口进人胰腺组织,染成蓝色。同样注意推动的压力。
1.2.3豚鼠以1%氯胺酮150πg/kg体重腹腔麻醉、固定,被皮去毛,在腹部正中偏上作一小切口,暴露十二指肠。在十二指肠升部可找到胰管及其开口,在胰管与十二指肠交界处轻轻分离胰管,将该处斜剪一小口,并在其下贯穿一根4/0线。将内径0.6m的PG-10管顶端剪成斜口,左手用显微镊夹住十二指肠,右手沿斜剪的小口插管,插入胰管内,结扎、固定插管。用注射器由插管缓缓推入美蓝美蓝沿胰管进入胰腺组织,染成蓝色.
3胰液采集方法
3.1小鼠按上述方法麻醉剖腹、固定,找出肝总管、胆总管,分别在两管下贯穿4/0线,准备结扎用。在胰管开口及胆总管与十二指肠交界处的胆总管,轻轻牵拉靠肠管的结扎线用显微剪在胆总管璧处剪一小口,将插管插入胆总管注意不易插入太长,用事先准备好的线结扎固定。再在肝总管处结扎肝总管。从插管另一端接胰液收集管,此时管内可见白色胰液流出。插管可在解剖显微镜下操作.
1,3.2大鼠将大鼠麻醉、仰卧固定。自上腹部剑状突部位向下作3cm左右腹正中切口用眼科镊柄将肝脏向上翻起,找出十二指肠和胃的交界处,用1/0线在交界处穿线备用。然后在十二指肠上离幽门2cm左右,找到与十二指肠垂直,稍带黄色透明的胆总管。在胆总管和十二指肠交界处,用眼科弯镊分离出胆总管。分离完毕,从胆总管下穿两根1/0线,靠肠管的一根结扎,作为牵引线。用眼科剪在胆总管壁斜剪一小口,将制作好的胰液收集管插入小口内。插进后,可见黄色胆汁和胰液混合液流出,结扎并固定,此管供收集胰液用。然后顺着胆总管向上可找到肝总管,结扎。此时,在胰液收集管内可见有白色胰液流出,胰液收集管后端可再接内径2cm的硅胶管,引出。胰液收集管可选用聚乙烯塑料软管,内径2mm,外径3m,长3cm左右,用时用力将一端拉细成内径0.5m,长约3-4m,剪成斜口在粗细交界处绕3-4圈0/0号缝合线.
1.3.3豚鼠可按胰管分布与开口位置识别方法将豚鼠麻醉、固定,作胰管插管。由插管另端收集胰液。
2结果与讨论
2.1啮齿类动物胰管分布与开口位置
2.1.1小鼠小鼠胰脏在十二指肠附近,呈粉红色。当找出胃和十二指肠轻拉脾脏可见胰腺。沿着胆囊向下可见一很细呈淡黄色或乳白色的小管,延伸并开口于十二指肠,即胆总管。当注入美蓝后,可清晰地看出胰管的分布及胰管开口。小鼠的胰管很多,众多小胰管不断汇合成较大胰管。胰腺十二指肠部组织所有胰管逐渐汇合成一条后大胰管,胰腺胆管部和胰腺胃脾部组织所有胰管逐渐汇合成一条前大胰管。前、后大胰管最后汇合成一条胰总管。胰总管不开口于十二指肠,而直接开口于胆总管,开口处(图中↑所示)约离胆总管在十二指肠开.
2.1.2大鼠大鼠胰脏也呈粉红色,在十二指肠附近。在十二指肠上离幽门2cm左右,有根和十二指肠垂直,稍带黄色透明的细管,即胆总管。把胃与脾之间的薄膜去除,可见在其下方十二指肠肠系膜上有如树枝状的肉色组织,即为胰腺。当注入美蓝后,可清晰地看出大鼠的胰管分布及开口不同于小鼠。大鼠的所有胰腺管均不直接开口于十二指肠,但也不最终汇合,而是分别不同程度地汇合开口于胆总管。胆总管上开口的胰管有许多条,其中有两条较大的胰管:前大胰管和后大胰管(在总胆管上的开口见图中↑所示)。前大胰管主要来自胰腺胆管部和胰腺胃脾部组织,后大胰管主要来自胰腺十二指肠部组织。大鼠的胆总管是由许多胰管和肝总管(由几只肝管汇集而成)一起汇合而成,然后开口于十二指肠。
2.1.3豚鼠豚鼠胰脏也呈粉红色、长而扁平的叶状,呈“V”字形,分头、体、尾「当注入美蓝后,可见豚鼠胰管分布及开口既不同于小鼠,也不同于大鼠。豚鼠胰头的大胰腺管是各叶的小管的汇合管、独立直接开口于十二指肠升部,距胆总管开口约7cm(胰管开口见图中↑所示)。豚鼠的胰腺无副管入十二指肠。
2.2关于啮齿类动物胰液釆集方法
2.2,1由于小鼠、大鼠、豚鼠的胰管走向及开口均互相不同,因此插管方式各异,不能一概论之.
2.2.2按照上述所介绍的方法可以成功地收集啮齿类动物的胰液,但小鼠的胰液量很少,只能用单位时间内流入塑料管的长度(cm)来计算.
2.2,3在分离、结扎胆总管或胰管时,注意不要弄破周围的小血管,并避免用手刺激胰腺组织,以免影响胰液的分泌.
 

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